Mike Enslin (John Cusack), seorang penulis cerita horor yang tengah mempromosikan bukunya, menerima kartu pos tentang hotel The Dolphin dengan tulisan "Don't enter 1408".
Mike menganggap bahwa surat tersebut ialah sebuah tantangan dan ia menjawabnya dengan menelepon hotel The Dolphin untuk memesan kamar nomor 1408. Namun, ia mendapatkan jawaban bahwa kamar dengan nomor tersebut tidak ada.
Penulis yang selalu melakukan observasi untuk karya tulisnya itu merasa penasaran dan yakin bahwa hotel tersebut akan menjadi bahan yang bagus untuk buku barunya. Mike kemudian meminta bantuan penerbitnya untuk memesankan kamar 1408 di The Dolphin.
Setibanya di The Dolphin, seluruh pegawai hotel mengatakan bahwa kamar dengan nomor tersebut tidak ada, sama seperti penjelasan yang ia terima lewat telepon sebelumnya. Mike tetap memaksa untuk diberikan kamar nomor 1408, sampai akhirnya ia harus berhadapan dengan Gerald Olin (Samuel L. Jackson), manajer hotel tersebut.
Olin kemudian menjelaskan tentang sejarah mengerikan yang terjadi pada kamar nomor 1408 itu dan menyarankan Mike agar mengurungkan niatnya menginap di kamar tersebut. Menurut Olin, tak ada yang bisa bertahan di dalam kamar tersebut lebih dari satu jam.
Bukannya takut, Mike malah merasa tertantang dan semakin ingin datang ke kamar tersebut. Dengan terpaksa, Olin akhirnya memberikan kunci kamar nomor 1408 yang ia simpan secara khusus. Apa yang kemudian terjadi pada Mike di dalam kamar nomor 1408 itu?
Mulai sekarang, kamu harus pilih-pilih kalau mau menginap di hotel, ya. Takutnya nanti malah nggak bisa keluar kayak tokoh film di atas. Ada film yang udah kamu tonton?